死，于70%酒精浸泡消毒，然后超净工作台内用无菌手术剪将小鼠腹部剪开一个小口，镊子剥离周围皮肤以便露出腹腔；”

弃上清，加入1ml完全培养基重悬细胞，然后稀释至所需用量体积，加入到96孔板；

这一步就算完成了。

接下来是免疫鼠脾细胞的准备，这一步虽然不容易，但也没能对胡嘉然他们造成太大的困扰。

细胞融合当天需要取三天前冲击免疫过的小鼠作为免疫脾细胞的来源，一般情况下免疫小鼠的脾脏体积大小是正常小鼠的两倍。

“在超净工作台内用高压灭菌好的手术剪将小鼠胸腔左下侧开一个小口，用镊子摘取脾脏后放于含3~5ml不完全培养基的皿中，剔除周围结缔组织，将脾脏转移至润湿的0.4目筛网中用研磨棒轻柔研磨，加入适量预冷的不完.”

原来胡嘉然挺高兴的，但没想到在融合的时候遇到了麻烦。

高风给的实验流程中是要将骨髓瘤细胞和免疫鼠脾细胞进行融合，可他们进行了多次的实验，结果均以失败告终。

“我感觉是比例的问题。”岳鹏辉说道，“两种细胞的比例在融合的时候起着很关键的作用。”

“还有温度！”一个叫王伟的说道，他是研究生学历，基本功很扎实，胡嘉然早就注意到了这个人。

“还有搅拌的速率。”刚来不到1个月的徐兵也发表了意见，“过快的搅拌速率会导致脾细胞破裂，太慢的话又容易凝固，我觉得速度为25r/min最为合适。”

众人都七嘴八舌的说了起来，实验到这个地方卡住了，都1周多了，一点进度也没有，大家都很着急。

“说的都挺有道理。”胡嘉然做了总结，“那接下来该怎么办呢？”

“能怎么干啊？往死里干呗。”王亮喊了起来，“四点睡，六点起，阎王夸我好身体！”

胡嘉然突然对这个逗比满意极了，“加班费发双倍的。”他同时使出了无坚不摧的钞能力。

半月后.

“这两天放假，大家好好歇歇。”胡嘉然很兴奋，但声音中明显透露着一股子虚弱。

他强打精神，开始把实验的详细流程给记录了下来：

充分打散沉淀，将1ml经过32c预热的50% peg匀速加入离心管中（用1ml的移液器，5 min内加完），期间用移液器枪头轻柔搅拌；

持续缓慢的用枪头搅拌3~4分钟；

匀速加入1ml经过37c预热的不完全培养基（1 min内加完），期间用移液器枪头轻

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